Simultaneous amyloglucosidase and exo-polygalacturonase production by Aspergillus niger using solid-state fermentation

Amyloglucosidase (AMG) and exo-polygalacturonase (exo-PG) were simultaneously produced by two different strains of Aspergillus niger in solid-state fermentation (SSF) using defatted rice-bran as substrate. The effect of Aspergillus niger strain (t0005/007-2 and/or CCT 3312), inoculum type (spore suspension or fermented bran) and addition of inducers (pectin and/or starch) to the culture media was studied using a 3² x 2¹ factorial experimental design. The production of AMG and exo-PG was significantly affected by fungal strain and inoculum type but inducers had no effect. The maximum yields obtained were 1310 U/g dm for AMG using a spore suspension of A. niger CCT 3312 and 50.2 U/g dm for exo-PG production, using A. niger t0005/007-2 and fermented bran as inoculum. The yields obtained represented acceptable values in comparison with data available in the literature and indicated that defatted rice-bran was a good nutrient source.

As enzimas amiloglicosidase (AMG) e exo-poligalacturonase (exo-PG) foram produzidas simultaneamente por duas cepas de Aspergillus niger, através de fermentação em estado sólido usando farelo de arroz desengordurado como substrato. Foram avaliados os efeitos da cepa de Aspergillus niger, tipo de inóculo e adição de indutores no meio de cultura, utilizando-se um planejamento experimental fracionário 3² x 2¹. O máximo rendimento obtido foi 1310 U/g ms para a produção de AMG e 50,2 U/g ms para a exo-PG. Comparando-se estes resultados com dados da literatura pode-se dizer que os rendimentos obtidos foram aceitáveis e indicam que o farelo de arroz desengordurado é uma boa fonte de nutrientes. A produção de AMG e exo-PG foi significativamente afetada pelas variáveis cepa de A. niger e tipo de inóculo, enquanto a variável indutor não apresentou influência significativa na produção destas enzimas.

Column bioreactor use for optimization of pectinase production in solid substrate cultivation

This study aimed to determine the influence of process variables and production, of polygalacturonase (PG) and polymetylgalacturonase (PMG) by solid substrate cultivation using a fixed bed column bioreactor. A fractional factorial design (FFD) was used to study the effect of the following variables: microorganism (Aspergillus oryzae and Aspergillus niger), substratum (wheat bran and defatted rice bran), aeration (40 and 60 ml h-1g-1), pectin (5 and 10 g g-1) and nitrogen (urea and ammonium sulfate). Microorganism, aeration and initial pectin were identified in FFD as significant variables (p<0.05) on PG production. A central composed design to optimize PG and PMG productions indicated that Aspergillus niger presents higher PG production; substratum and nitrogen do not affect PG production; the aeration rate affects positively the production of PG and negatively the production of PMG and the initial pectin concentration affects positively both PG and PMG production. The optimal point of aeration and initial pectin concentration for PG production are 66.13 ml h-1 g-1 and 12.8 g g-1, respectively and for PMG production are 40 ml h-1 g-1 and 15.0 g g-1, respectively.

O objetivo deste trabalho foi determinar a influência de variáveis de processo na produção das enzimas poligalacturonase (PG) e polimetilgalacturonase (PMG) por cultivo semi-sólido utilizando bioreator de coluna. Um planejamento fatorial fracionário foi utilizado para determinar o efeito das variáveis "microrganismo" (Aspergillus oryzae e Aspergillus niger), "substrato" (farelo de trigo e farelo desengordurado de arroz), "aeração" (40 e 60 ml h-1 g-1), "pectina" (5 e 10 g g-1) e "nitrogênio" (uréia e sulfato de amônia) para a produção de PG. Microrganismo, aeração e pectina foram significantes (p<0,05) para a produção de PG. Utilizando-se um planejamento composto central com quadruplicata no ponto central concluiu-se que Aspergillus niger apresenta maior produção de PG, o substrato e a fonte de nitrogênio não afetam (p<0,05) a produção de PG, a aeração afeta positivamente a produção de PG e negativamente a de PMG, e a concentração inicial de pectina afeta positivamente a atividade de ambas enzimas. Os pontos ótimos de aeração e de concentração inicial de pectina para a produção de PG são 66,13 ml h-1 g-1 e 12,8 g g-1, respectivamente, e para a produção de PMG são 40 ml h-1 g-1 e 15,0 g g-1, respectivamente.

Determinação de vitamina A em pescado: adaptação de metodologia / Vitamin A determination in fish: methodology adaptation

O objetivo deste trabalho foi extrair e determinar a vitamina A em músculo de pescado através de um método simples e confiável. A metodologia adaptada consistiu em determinar espectrofotometricamente palmitato de retinila extraído de lipídios de músculo de pescado pelo método de Bligh e Dyer (1959). No extrato lipídico aplicou-se uma técnica de limpeza empregando cromatografia de partição em minicoluna de alumina neutra, para separar a vitamina sem o emprego da saponificação, seguida de quantificação espectrofotométrica a 325 nm pela técnica de adições sucessivas. Para avaliação do potencial do método foram avaliados os coeficientes de variação (4 a 7 por cento) e a recuperação média (90,7 por cento). Estes dados de recuperação são promissores quando comparados a valores obtidos quando se empregou o método colorimétrico de Carr Price às amostras, contendo concentrações conhecidas de padrão, eliminando interferentes pelo método oficial (57 por cento) e pelo proposto (75 por cento). O método adaptado foi aplicado em amostra in natura, industrializada (enlatada) e processada termicamente (assada), mantendo suas características de repetibilidade e recuperação, a exceção de quando aplicado às amostras de pescado enlatado. A aplicação do método a amostras in natura de enchova (Pomatonus saltatrix) e de tainha (Mugil brasiliensis), porção comestível, resultou em níveis de 303 ER/100g (CV=5 por cento) e 214 ER/100G (CV=7 por cento) de vitamina A . Em enchova assada foi encontrado 255 ER/100(CV=4 por cento) de vitamina A